雙光束紫外可見分光光度計是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的精密儀器。
一、原理
雙光束紫外可見分光光度計基于比較樣品溶液與參比溶液對不同波長的光的吸收和透射程度的差異，從而進(jìn)行定量分析。其基本原理如下：
1.光源發(fā)射：通常采用氘燈作為紫外光源和鎢燈作為可見光源。氘燈主要用于紫外區(qū)域，鎢燈主要用于可見區(qū)域。
2.分束系統(tǒng)：光源發(fā)射的光線通過準(zhǔn)直系統(tǒng)進(jìn)入分束器，分束器將光線分為兩束，一束作為參比光束，另一束作為樣品光束。
3.樣品測量：參比光束和樣品光束分別通過樣品池，樣品池中放置著待測樣品溶液。根據(jù)樣品溶液的吸收特性，將吸收光信號轉(zhuǎn)化為電信號。
4.檢測系統(tǒng)：光電二極管將參比光束和樣品光束的光信號轉(zhuǎn)化為電信號，并通過放大器進(jìn)行放大。
5.數(shù)據(jù)處理：通過將參比光信號和樣品光信號作差，并經(jīng)過一系列計算和校正，得到最終的吸光度值。
二、結(jié)構(gòu)
通常由以下幾個主要部分組成：
1.光源：包括氘燈和鎢燈，分別負(fù)責(zé)紫外和可見光區(qū)域的光源發(fā)射。
2.分束器：將光源發(fā)射的光線分為參比光束和樣品光束。
3.樣品池：用于放置待測樣品溶液的容器，通常是石英或玻璃制成。
4.光電傳感器：用于將光信號轉(zhuǎn)化為電信號，常用的光電傳感器有光電二極管。
5.放大器：對光電傳感器輸出的電信號進(jìn)行放大。
6.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：對放大后的信號進(jìn)行計算、校正和顯示，得到最終的吸光度值。
三、工作方式
雙光束紫外可見分光光度計的工作方式主要包括以下幾個步驟：
1.校零：將樣品池中的溶劑作為參比光束和樣品光束的參考，進(jìn)行校零操作，消除光源和光學(xué)系統(tǒng)的背景。
2.加載樣品：將待測溶液放置到樣品池中，確保樣品在透射光線路徑中。
3.掃描光譜：通過改變分光光度計的波長或重置濾光片，對一段波長范圍內(nèi)的吸光度進(jìn)行掃描。
4.記錄數(shù)據(jù)：將吸光度數(shù)據(jù)記錄下來，并可通過連接計算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)存儲和進(jìn)一步分析。
四、應(yīng)用
廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的定量分析和質(zhì)量控制。它的應(yīng)用包括但不限于以下幾個方面：
1.藥物分析：用于藥物含量的測定、質(zhì)量評價和藥代動力學(xué)研究。
2.生物分析：用于蛋白質(zhì)、核酸和酶等生物大分子的定量分析。
3.環(huán)境監(jiān)測：用于水體、大氣和土壤中污染物的測定和追蹤。
4.食品安全：用于食品中添加劑、殘留物和營養(yǎng)成分的定量分析。
5.化學(xué)研究：用于化合物濃度測定、反應(yīng)動力學(xué)和光譜特性研究。
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