根據(jù)量子光學(xué)理論，波長(zhǎng)是能量的倒數(shù)，波長(zhǎng)短能量大，容易產(chǎn)生雜散光，而220nm處屬于短波部分；根據(jù)儀器學(xué)理論中的電光源理論，氘燈在220nm處能量很小，即信號(hào)很小，容易顯現(xiàn)雜散光。

　　通過溶液的光必須是平行的;通過溶液的光必須是單色光;待測(cè)溶液必須是純凈的、均勻的且濃度不宜過高，這是瑯伯-比爾定律首要的三個(gè)前提條件。但是在實(shí)際的紫外可見分光光度計(jì)的制造和使用過程中這三個(gè)條件是不可能達(dá)到的。因?yàn)楣馐侵本€傳播的，在分光光度計(jì)制造過程中，燈源發(fā)出的光是發(fā)散的，經(jīng)過聚焦鏡進(jìn)行聚焦等直到經(jīng)過溶液的整體過程中，光是不可能平行的。

　　燈源發(fā)出的光是復(fù)合光，經(jīng)過狹縫，再經(jīng)過光柵分光等步驟，因?yàn)槭艿姜M縫和光柵本身的限制，光柵分光不可能達(dá)到純單色光。還有光度計(jì)的整體設(shè)計(jì)問題，光度計(jì)不可能沒有其它的雜光存在。用戶的溶液也不可能是純凈的，也會(huì)含有一些雜質(zhì)，這些對(duì)光度的吸收都會(huì)存在影響。

　　除以上三個(gè)方面的影響外，在實(shí)際的光度計(jì)應(yīng)用過程中還會(huì)存在其他因素的影響，例如：經(jīng)過比色皿的光是否垂直;比色皿寬度是否為10mm的標(biāo)準(zhǔn)值;測(cè)試波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確;程序設(shè)計(jì)是否存在漏洞等等，都會(huì)直接影響到利用瑯伯-比爾定律計(jì)算出的結(jié)果。所以在日常的測(cè)試過程中，得出的結(jié)果和瑯伯-比爾定律有些偏差是很正常的，只是我們關(guān)注偏差多少的問題。

　　因此，UV2000紫外可見分光光度計(jì)只測(cè)試220nm處的雜散光，不測(cè)試340nm處的雜散光，這樣是不正確的，需測(cè)試220nm處雜散光。因?yàn)楦鶕?jù)儀器學(xué)理論中的光電發(fā)射理論，光電倍增管在220nm處的光譜響應(yīng)（靈敏度）低，容易顯現(xiàn)雜散光。而測(cè)試340nm處雜散光的原因是*不同的，因?yàn)?40nm處一般是氘燈換鎢燈和儀器調(diào)換濾光片的地方，此時(shí)zui容易產(chǎn)生雜散光。

　　所以，對(duì)于UV2000紫外可見分光光度計(jì)來講，應(yīng)該測(cè)試220nm和340nm兩處的雜散光。UV2000紫外可見分光光度計(jì)雜散光測(cè)試步驟，首先將參比液注入配對(duì)石英石吸收池，分別放置在參比池座和試樣池座內(nèi)。再測(cè)定波段掃描基線并使之平滑。將減光片插入試樣光路的濾光片槽內(nèi)，其讀數(shù)即為減光片的衰減值K，然后將減光片插入?yún)⒈裙饴返臑V光片座內(nèi)，將石英吸收池中的蒸餾水依次換成上述截止濾光液，插入試樣試樣池座中，在相應(yīng)的波段內(nèi)掃描、打??；在記錄紙的作標(biāo)上量取測(cè)定波長(zhǎng)處的透光度，乘以衰減值K，即得各測(cè)定波長(zhǎng)處的雜散光值。